做荧光定量一定要使用全长的基因吗,我可以用一个360bp的片段去做荧光...
1、部分，长度在250bp左右，不能太长，不然扩增效率会影响实验结果。
2、可以的，50bp到150bp都可以，只要你设计的引物探针特异性好，是可以做出来的；不过一般都是100bp-150bp左右比较好，我研究过中山达安公司09年的H1N1检测试剂盒，通过TA克隆得知，他们的检测H1N1病毒的H1跟N1两管混合液中扩增目的片段的长度都是70bp左右。
3、在实际操作中，荧光定量PCR的扩增片段控制范围非常重要，通常建议在80-300bp之间，以避免引物二聚体和扩增效率问题。引物设计是关键环节，理想的引物长度为20-24bp，确保其Tm值在60℃左右，以保证高效和特异性。荧光染料法和探针法是qPCR的两种常用方法。
4、|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段。
5、或者减少复孔量每个目的基因设计2-3个引物，因为引物很便宜，选择溶解曲线最好的做。开始做都会出现复孔不稳定的情况，做几次操作熟练了复孔数值稳定之后就可以不用复孔了，直接把组内样本一个个上上去。
大小的DNA片段应选择哪一种测序方式
第1 代测序技术——荧光标记的Sanger 法 第一代就不说了。
DNA片段应选择哪一种测序方式 测序有DNA测序和RNA测序，之前比较早的测序是以芯片为基础，现在常用的是二代测序，全基因组的测序以及RNA-seq，目前比较高级的还有单细胞测序。随之而来的是第三代测序技术， 第三代测序技术则是基于纳米孔的单分子读取技术，这种方法读取数据更快、有望大大降低测序成本。
Sanger 测序，用链终止法和毛细管电泳，这个是第一代测序的主要方法，至今仍然在使用。边合成边测序：454和Illumina测序都采用的这种方法，不过，有一些区别。
第三代DNA测序：单分子测序 用一种聚合酶将DNA的复制限制在一个微小的间隙中，给各种碱基加上荧光示踪标记，当碱基合成DNA链时，这些荧光标记就会发出不同颜色的闪光，根据闪光颜色就可识别出不同的碱基。
分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。它是一台能自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析等全自动电脑控制的测定DNA片段的碱基顺序或大小和定量的高档精密仪器。PE公司还提供凝胶高分子聚合物，包括DNA测序胶（POP 6）和GeneScan胶（POP 4）。
DNA测序（DNA sequencing，或译DNA定序）是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。RNA测序则通常将RNA提取后，反转录为DNA后使用DNA测序的方法进行测序。
去基因检测公司测一下基因序列要花多少费用?
肿瘤基因检测的费用受多种因素影响，包括检测的基因数量和所使用的测序平台。因此，价格范围可以从几百元到几万元不等。 基因检测的成本主要取决于需要检测的基因数量。例如，单一系统的检测费用通常在5000元左右。
基因检测的价格因类型、目的和提供者而异，范围可以从几十美元到数千美元不等。基础的遗传疾病筛查或风险评估可能在几百美元左右，如新生儿筛查或某些常见遗传病的检测。
基因检测价格差异大：根据2019年12月9日的数据，基因检测的价格范围从800元到数十万元的全面基因组测序不等。价格受检测内容、试剂和测序仪器成本、不同检测医院等因素影响。 儿童基因检测价格悬殊：在淘宝等平台上，儿童基因检测的价格差异显著，从不足一百元到高达五六千元，让消费者难以抉择。
无创亲子鉴定价格及检测技术
无创胎儿亲子鉴定价格在4000-5000元左右，正常情况下5天出具鉴定报告。无创亲子鉴定只需收集孕妇（15毫升）静脉血，利用新一代DNA测序技术对母体外周血浆中的游离DN段（包括胎儿游离DNA）进行测序，分析测序结果。
杭州做亲子鉴定需要2200-4200之间，个人隐私亲子鉴定2200元到2600元，司法2600元到3600元，无创DNA鉴定4000元-4200元，杭州是中国的一座大城市，有许多正规的亲子鉴定机构。
无创胎儿亲子鉴定费用在4000元-5000元左右，孕妇抽取10ml静脉血，疑父样本与个人隐私采集样本一样即可。亲子鉴定正常情况下是5-7天出鉴定结果，需要注意的是一般影响价格的是否加急鉴定速度以及样本的特殊性。合肥亲子鉴定中心在哪里？想要做亲子鉴定可以去当地正规的亲子鉴定中心。
司法鉴定二联体为3200元，司法鉴定三联体为3300元。个人亲子鉴定，父子（女）、母子（女）两人鉴定为3200元，父、母、子（女）三人一起鉴定则为3300元。胎儿亲子鉴定，鉴定总费用为4200元/例。建议大家如果需要做亲子鉴定，应该到有司法鉴定资质的正规亲子鉴定机构做，避免一些不必要的损失。
①无创亲子鉴定，是利用新型DNA测序生物技术对孕妇游离在外周血中的DNA片段（包含孕期胎儿DNA）进行基因测序、生物学信息分析，从而获得胎儿的遗传信息，并与疑似父亲样本信息进行比对，来确定胎儿与父亲的亲子关系确认。无创产前亲子鉴定大概费用在5000-7000元。②有创亲子鉴定，包括羊水穿刺、绒毛穿刺两种。
cdna为模板,引物怎么设计监测含量
引物设计完成以后，应对其进行BLAST检测。值得一提的是，各种模板的引物设计难度不一。有的模板本身条件比较困难，例如GC含量偏高或偏低，导致找不到各种指标都十分合适的引物；用作克隆目的的PCR，因为产物序列相对固定，引物设计的选择自由度较低。在这种情况只能退而求其次，尽量去满足条件。
引物最好在模板cDNA的保守区内设计。引物长度一般在15-30碱基之间。引物GC含量在40%-60%之间，Tm值最好接近72℃。引物3′端要避开密码子的第3位。引物3′端不能选择A，最好选择T。碱基要随机分布。引物自身及引物之间不应存在互补序列。
引物在模板cDNA的保守区内设计。引物长度在15到30碱基之间。设计引物GC含量在40%到60%之间，Tm值接近72摄氏度。